Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

Hormozgan University of Medical Sciences

استفاده از سرم دکستروز 5 حاوی پلاسمای خودی جهت جداسازی مونوسیتها

(2013) استفاده از سرم دکستروز 5 حاوی پلاسمای خودی جهت جداسازی مونوسیتها. Hormozgan Medical Journal.

[img]
Preview
Text
hmj-v16n6p429-en.pdf

Download (232kB) | Preview

Official URL: http://hmj.hums.ac.ir/article-1-838-en.html

Persian Abstract

مقدمه: کشت سلولهای پستانداران یکی از روشهای مهم و با اهمیت است که در زمینه‌های مختلف از جمله تولید پروتئین های نوترکیب، آنتی بادی مونوکلونال و هورمونها کاربرد دارد. مونوسیت‌ها و ماکروفاژها، از سلولهای مؤثر در پاسخ‌های ایمنی در مقابل آنتی ژن های بیگانه هستند. جداسازی این سلولها از سلولهای تک هسته‌ای خون محیطی با روشهای مختلفی صورت می‌گیرد، یکی از روشهای متداول در جداسازی مونوسیتها از سلولهای تک هسته‌ای خون محیطی استفاده از فلاسک کشت سلولی حاوی محیط RPMI 1640 است. هدف از این مطالعه طراحی محیط کشت سلولی با استفاده از دکستروز 5 درصد همراه با پلاسم ی اتولوگ به منظور تولید محیط کشت ارزان و در دسترس برای جداسازی مونوسیتها بوده است. روش کار: در این مطالعه‌ای تجربی، از 40 داوطلب، سلولهای تک هسته‌ای خون محیطی جدا شده و در شرایط یکسانی در محیط‌های RPMI 1640و سرم دکستروز5 درصد حاوی پلاسمای اتولوگ (autologous plasma) تحت شرایط دمای 37 درجه و 5 دی اکسید کربن کشت داده شد. سپس تعداد، میزان زنده بودن و مرفولوژی سلولها، با استفاده از رنگ تریپان بلو و میکروسکوپ Invert مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: 106×2- 8/1 سلول از محیط کشت RPMI و 106 ×2/2-2 سلول از سرم دکستروز 5 حاوی پلاسمای خودی جدا شد که از نظر آماری بین دو روش تفاوت معنی‌داری وجود نداشت. همچنین تفاوت مورفولوژیکی بین دو محیط مشاهده نشد. نتیجه‌گیری: نتایج ما نشان داد که از سرم دکستروز 5 می‌توان در جداسازی مونوسیتها از سلولهای تک هسته‌ای خون محیطی استفاده کرد. بنابراین می‌توان نتیجه گرفت که این روش یکی از تکنیک‌های ساده برای جداسازی مونوسیتها است

Title

Monocyte isolation using serum dextrose 5 with autologous plasma

Abstract

Introduction: Mammalian cells culture is an important method for producing recombinant proteins, monoclonal antibody, and hormones application. One of the common methods in the monocyte isolation is using flask adherent cell culture in RPMI-1640 medium. We aimed, in this study, cell culture medium using dextrose 5 with autologous plasma to produce inexpensive medium for isolation of monocytes. Methods: In this experimental study, we isolated peripheral blood mononuclear cells from 40 healthy volunteers, the isolated cells were cultured in RPMI 1640 medium containing 10 fetal calf serum and in the media supplemented serum dexterous 5containing autologous plasma under 37°C and 5 CO2 in a cell incubator. Then, count, viability and morphological cells were surveyed by trypan blue and invert microscope. Results: We isolated 1.8- 2× 106 cells /ml of RPMI culture media and 2- 2.2×106 /ml macrophage of serum dexterous 5 containing autologous plasma. There was not a significant difference between two methods (P>0.05). Also, we did not see any morphological variation in two culture media. Conclusion: Our results showed that dextrose 5 can be used in monocyte isolation from peripheral blood mononuclear cells

Item Type: Article
Keywords: Cell Culture – Serum – Monocytes
Persian Keywords: کشت سلولی - سرم – مونوسیت‌ها
Subjects: medical microbiology
bacteriology
Divisions: Research Vice-Chancellor Department > Hormozgan Medical Journal
Depositing User: Hormozgan Medical Journal
URI: http://eprints.hums.ac.ir/id/eprint/1233

Actions (login required)

View Item View Item